非洲豬瘟壓力下的豬場消毒劑的選擇

來源:豬業(yè)科學(xué)，中國知網(wǎng) | 作者:李其松，王勝，黃健，吳春陽，吳玉龍 | 發(fā)布時(shí)間: 2020-05-25 | 3022 次瀏覽 | 分享到:

自 2018 年 8 月非洲豬瘟首次在中國發(fā)現(xiàn)以來，一年多來非洲豬瘟給養(yǎng)豬業(yè)造成幾乎毀滅性的打擊，市民們深感菜籃子中豬肉之沉重，豬價(jià)及生豬產(chǎn)業(yè)的發(fā)展多次出現(xiàn)在國家領(lǐng)導(dǎo)人的關(guān)注之下。各種鼓勵(lì)養(yǎng)豬政策不斷出臺(tái)，各大研究院所專家及集團(tuán)企業(yè)發(fā)布了諸多的復(fù)養(yǎng)方案，復(fù)養(yǎng)方案中豬場生物安全的建設(shè)都會(huì)提高到最為重要的環(huán)節(jié)，然而在針對非洲豬瘟壓力下，消毒劑的選擇還存在不少謬誤，筆者就非洲豬瘟壓力下豬場的消毒劑選擇作一論述。

1. 非洲豬瘟病毒的特點(diǎn)

非洲豬瘟（ASF）是由非洲豬瘟的病毒（ASFV）感染家豬和野豬引起的一種烈性傳染病。非洲豬瘟病毒在脂質(zhì)溶劑、洗滌劑、氧化劑里面很容易失活，比如次氯酸鹽和苯酚。如 ASFV 與 2.3% 的氯和3% 的鄰苯基苯酚，或者合成的碘溶液接觸 30min 就會(huì)失活。其他使ASFV 失活的有效措施包括福爾馬林、氫氧化鈉等?？傊?，肥皂水、洗滌劑、堿性物質(zhì)對畜舍、器具、衣物、工具、人類居所等消毒非常有效。飛機(jī)上的消毒劑推薦使用衛(wèi)可。被病毒污染的飼料、飲水和肥料應(yīng)被掩埋或焚燒。被 ASFV 污染豬糞可用 1% 氫氧化鈉或氫氧化鈣4 ℃處理 3 min 或 0.5% 濃度處理30 min。ASFV 在 pH 4 ～ 10 的溶液中比較穩(wěn)定，但在 pH 小于 4 或大于 11.5 的條件下，并且培養(yǎng)基中不含血清會(huì)立刻失活；在 25% 的含有血清的培養(yǎng)基，且 pH 為 13.4的條件下可以存活數(shù)天；5 ℃的血清中可以存活 6 年以上。非洲豬瘟病毒對溫度敏感，在 60 ℃的條件下持續(xù) 30 min，或者 56 ℃持續(xù)70 min 都能滅活；在豬的糞便中保持感染性能達(dá)到數(shù)周，在腐敗的血液中可存活 15 周，在室溫保存的血清或血液中可存活 18 個(gè)月。

總之，ASFV 是有囊膜病毒，沒有有機(jī)物保護(hù)是很容易被滅活，但在有機(jī)物保護(hù)下，該病毒對環(huán)境及消毒劑抵抗力又變得很強(qiáng)大，養(yǎng)殖場環(huán)境中 ASFV 總是被有機(jī)物保護(hù)，消毒劑選擇必須考慮到這一點(diǎn)。

2 消毒的定義及效果影響因素

2.1 消毒與滅菌的區(qū)別

消毒與滅菌是不同數(shù)量級(jí)的清除殺滅微生物的概念。

消毒是指殺滅或去除外環(huán)境中各種病原微生物，目標(biāo)是達(dá)到無害化的過程。正常消毒的標(biāo)準(zhǔn)要求是微生物滴度降低量達(dá)到 103 量級(jí)就可以，即消毒的結(jié)果是殺滅或者清除微生物達(dá)到 99.9% 就是符合消毒要求。若用消毒對象污染的自然微生物的殺滅率來評(píng)定消毒效果，一般以殺滅或清除率達(dá)到 90% 為合格。

滅菌是指殺滅或去除外環(huán)境中一切微生物（包括且不限于病原微生物）的過程。因此目前國際上規(guī)定，滅菌過程必須使滅菌物品污染的微生物的存活概率降低到 10-6。而針對非洲豬瘟這個(gè)特定疫病的危害嚴(yán)重性，顯然常規(guī)的消毒標(biāo)準(zhǔn)是不適合的，針對非洲豬瘟病毒的殺滅要力爭采用滅菌級(jí)的標(biāo)準(zhǔn)。

2.2 消毒效果的幾個(gè)影響因素

2.2.1 化學(xué)消毒劑的特性

1）化學(xué)消毒劑的種類

消毒劑的選擇必須針對要處理或者消滅的微生物的特點(diǎn)來確定，例如細(xì)菌芽孢或者非囊膜病毒必須選用滅菌級(jí)消毒劑，選用低效消毒劑（單鏈季銨鹽）效果就很差。非洲豬瘟病毒為有囊膜病毒，在沒有有機(jī)物保護(hù)的裸病毒時(shí)很容易被季胺鹽類滅活，10% 癸甲溴銨稀釋3200 倍，20 ℃，作用 10 min 病毒滴度降低 3.6 Log。 2）消毒劑的配方優(yōu)異的消毒劑配方能顯著提高消毒效果。復(fù)方消毒劑的代表產(chǎn)品是衛(wèi)可（Virkon? S），其主要成分是過硫酸氫鉀復(fù)合物能產(chǎn)生生物殺滅劑——高活性氧；偏磷酸鹽能中和硬水中的金屬離子；烷基苯磺酸鈉起到表面活性劑作用，濕潤消毒物體表面；蘋果酸能降低 pH，增效生物殺滅劑；氨基磺酸降低 pH，氧化因子和氯化鈉通過化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生氯化因子，綜合具有“氧化、氯化、酸化”三合一功效，并佐劑成分有效去除了有機(jī)物和硬水的影響，有效性的顏色指示劑。復(fù)配后成效顯著：殺菌譜廣，性質(zhì)穩(wěn)定，速效，可在低溫下使用，不易受有機(jī)物、酸、堿及其他物理、化學(xué)等因素的影響，對金屬器械無腐蝕，無毒無殘留，溶于水能飲用。 3）消毒劑的濃度劑量消毒劑的濃度劑量是操作過程中的基本條件之一。首要是保障消毒劑的劑量，在配比濃度時(shí)一般都是以有效成分凈含量來進(jìn)行配比，不正規(guī)生產(chǎn)企業(yè)標(biāo)簽中往往有陷阱，導(dǎo)致配比濃度往往達(dá)不到應(yīng)有比例。

2.2.2 外界因素

1）環(huán)境溫度

總所周知，大部分消毒劑隨著溫度的降低，活性下降，溫度越高消毒劑效率越好。溫度高低對消毒效果的影響，往往隨消毒方法、化學(xué)成分及微生物種類不同而不同。例如，戊二醛在低溫的使用效果就不如在高溫的使用效果，因此低溫季不建議使用戊二醛。

2）環(huán)境相對濕度

氣霧噴霧消毒和熏蒸消毒受環(huán)境相對濕度的影響十分明顯，環(huán)境中的濕度過大會(huì)降低消毒劑的濃度，直接導(dǎo)致消毒劑效果失效。例如甲醛熏蒸消毒的最佳相對濕度為80% ～ 90%。

3）消毒劑的作用時(shí)間

國標(biāo)中評(píng)價(jià)消毒劑的作用時(shí)間一般為 30 min，可是現(xiàn)場操作中往往達(dá)不到 30 min，直接導(dǎo)致消毒劑對微生物的殺滅效果下降，例如部分消毒池人經(jīng)過時(shí)不到 1 min，這種即時(shí)接觸是達(dá)不到效果的，而對這方面的研究國內(nèi)還較少。

4）消毒時(shí)環(huán)境的酸堿度

酸堿度的變化對消毒的效果影響很大：一方面部分消毒劑只有在特定的酸或堿環(huán)境中才有效；另一方面酸堿環(huán)境中微生物的存活強(qiáng)度也不同。例如 ASFV 在 pH 4 ～ 10的溶液中比較穩(wěn)定，但在 pH 小于 4或大于 11.5、不含血清的培養(yǎng)基中ASFV 會(huì)立刻失活。

5）表面活性和稀釋用水的水質(zhì)

在使用表面活性劑消毒時(shí)應(yīng)格外小心，例如陰離子表面活性劑會(huì)影響單鏈季銨鹽類的消毒作用；例如部分地區(qū)的硬水（水中含鈣、鎂離子高）等也容易消耗消毒劑的消毒成分。

6）有機(jī)物質(zhì)類的干擾

養(yǎng)豬場的環(huán)境中會(huì)殘留大量的有機(jī)物，例如蛋白質(zhì)、尿液、血液、油脂等物質(zhì)，這類物質(zhì)不但是微生物的保護(hù)傘，還會(huì)消耗化學(xué)消毒劑，容易使消毒劑與有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致消毒效果的下降。例如普通的氯制劑、季銨鹽及過氧化物類的消毒劑受有機(jī)物干擾比較明顯，醛制劑受有機(jī)物的影響相對較小。因此，在消毒前，建議先做消毒對象表面的清理和清潔工作，清除消毒對象的表面有機(jī)物和生物膜。同時(shí)要注意選擇消毒劑有效性測試時(shí)的模擬現(xiàn)場的有機(jī)物的環(huán)境。

7）滲透性

消毒環(huán)境的表面往往是凹凸不平的，而且還存在大量的縫隙，作為消毒劑必須要能夠滲透到所有消毒物品的表面，達(dá)到消毒的全方位。不同消毒劑的滲透性不同，例如用作熏蒸時(shí)甲醛蒸汽比環(huán)氧乙烷穿透力差。優(yōu)秀的消毒劑必須具備很強(qiáng)的滲透有機(jī)物表面的能力。

8）消毒設(shè)備在實(shí)際的畜牧生產(chǎn)過程中，消毒都是借助消毒設(shè)備來實(shí)現(xiàn)。消毒設(shè)備對消毒效果的影響主要是，噴霧霧滴的大小，霧滴的懸浮時(shí)間，一般來說，霧滴越小，懸浮時(shí)間越長，和有害微生物的接觸時(shí)間越久，消毒效果就越好。

9）微生物種類特性和數(shù)量級(jí)

因?yàn)椴煌⑸锏淖陨硖匦詫Σ煌愋偷南緞┑目剐砸膊煌?，因此消毒劑選擇還要考慮環(huán)境中的主要微生物的種類和數(shù)量級(jí)，污染嚴(yán)重和高數(shù)量級(jí)的環(huán)境必須選擇高效的消毒劑。

3 非洲豬瘟壓力下豬場消毒劑選擇要點(diǎn)

3.1 殺滅非洲豬瘟病毒的消毒劑概述

世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（Office International Des Epizooties OIE) 建議對 AFSV 可使用 0.8% 氫氧化鈉、2.3% 次氯酸鹽、0.3% 福爾馬林、3% 鄰苯基苯酚和碘混合物進(jìn)行消毒，但均需作用 30 min 可滅活病毒。農(nóng)業(yè)農(nóng)村部推薦的防控非洲豬瘟的消毒劑見表 1。

3.2 非洲豬瘟壓力下選擇消毒劑的要點(diǎn)

3.2.1 注重消毒“藥”的概念

不同的消毒“ 藥 ” 對 ASHV殺滅比例也存在著極大差異，非瘟壓力下選擇消毒“藥”也需要根據(jù) ASFV 的特點(diǎn)選擇有效的產(chǎn)品。除了有效外還要考慮殺滅的程度，據(jù)中國獸醫(yī)協(xié)會(huì)編寫的《非洲豬瘟知識(shí)手冊》，國外有實(shí)驗(yàn)室用高毒力或中等毒力的 ASFV 感染豬只后，血液中最高病毒滴度可達(dá) 109HAD50/mL，口腔液、尿液和糞便中最高滴度可達(dá) 105HAD50/mL。另有研究表明，水是非?？焖俚母腥就緩?，在水里面含量只要有一個(gè) TCID50 就會(huì)引起感染。因此對防控 ASFV 飲水消毒不能是有效，而是要滅菌級(jí)。

3.2.2 注重“用藥量”的概念

上面所提到消毒劑需要合理的配比比例，確保有效的問題；對于現(xiàn)場用量來說，還需要考慮豬舍的空間和面積，例如空舍消毒按地面面積 ×2.5 作為整棟舍的面積，墻面、天花板、地面的消毒藥的用量為 300 ml/m2，噴霧消毒 40～80 ml/m2（注意消毒霧滴大小）。

3.2.3 綜合各方面因素，準(zhǔn)確用“藥”

從表 2 可以看出針對非洲豬瘟病毒，消毒劑的種類不同、使用劑量、作用時(shí)間、環(huán)境溫度及有機(jī)物污染等，造成病毒滴度降低量差異顯著，生產(chǎn)上可根據(jù)消毒的對象和目的，選擇合適的比例。如人穿雨鞋在腳踏盆消毒，考慮有機(jī)物干攏，如停留時(shí)間短于 1 min，可以選擇1∶100 衛(wèi)可；如停留 10 min，則可按 1∶800 稀釋。另 ASFV 在有機(jī)物存在下抗力增強(qiáng)，所以在消毒前清洗就更為重要。

3.2.4 高效消毒劑定義有別于養(yǎng)豬生產(chǎn)中高效的消毒劑

化學(xué)消毒劑可分為高效、中效和低效消毒劑。高效消毒劑能殺滅包括細(xì)菌芽孢和真菌孢子在內(nèi)的外界環(huán)境中的各種微生物的消毒劑，又稱滅菌劑。例如，在化學(xué)消毒劑的劃分上，醛類是高效消毒劑，因?yàn)?/span> 2% 戊二醛 30 min 可以殺滅破傷風(fēng)的芽孢；針對非洲豬瘟病毒，某醛制劑產(chǎn)品（12.74% 戊二醛 +4.84% 癸甲氯銨）在 20 ℃、1%有機(jī)物中加磷酸緩沖液（pbs）作用 30 min，稀釋比例為 1∶50，非洲豬瘟病毒滴度降低量為 4.6 log。如生產(chǎn)中使用國內(nèi)常見的一種 2% 的稀戊二醛則濃度理論上至少應(yīng)該為1∶8 稀釋，而且非復(fù)方的顯然影響滅活效果。因此高效消毒劑只是代表其主要成分，在生產(chǎn)實(shí)踐中還因考慮多種因素。

3.2.5 要了解產(chǎn)品主要成分和特性，避免盲目使用

生產(chǎn)中要了解產(chǎn)品性能，除了對 ASFV 有效，同時(shí)要根據(jù)表 3 避免用刺激性強(qiáng)的消毒劑進(jìn)行帶豬消毒，若使用不當(dāng)會(huì)刺激豬的眼睛、呼吸道黏膜，豬的呼吸道黏膜受損會(huì)讓 ASFV 更容易入侵豬體。

3.3 豬場消毒工作前要進(jìn)行清理和清潔工作

由于豬舍存在如灰塵、糞便、尿液及血液等大量有機(jī)物，這些有機(jī)物大大提高了非洲豬瘟病毒對環(huán)境的抗性，消毒前使用專用的泡沫清洗劑有利于提高消毒效果。

4 非洲豬瘟消毒效果評(píng)價(jià)

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸醫(yī)研究所編制《非洲豬瘟防控清潔消毒技術(shù)要點(diǎn)》，列出非洲豬瘟消毒效果評(píng)價(jià)方案。

1）設(shè)置消毒指示微生物評(píng)價(jià)消毒效果

消毒前，將枯草桿菌芽孢涂于棉布或紗布，作為消毒指示微生物，置于待消毒場所。消毒結(jié)束后，檢測芽孢殺滅率。殺滅率達(dá)到 99.9%以上，判定消毒合格。

枯草桿菌芽孢抗性是強(qiáng)于朊病毒（瘋牛病病原）以外的所有微生物，非洲豬瘟病毒是有囊膜病毒，對消毒劑抗力較弱，故可以枯草桿菌芽孢作為消毒指示微生物評(píng)價(jià)滅殺非洲豬瘟病毒的效果。

2）檢測非洲豬瘟病毒評(píng)價(jià)消毒效果

消毒后，在養(yǎng)殖場、交易市場、屠宰場、無害化處理場點(diǎn)、疫區(qū)臨時(shí)檢查站點(diǎn)等高風(fēng)險(xiǎn)場所，采集樣品，并進(jìn)行非洲豬瘟病毒的檢測。針對病毒消毒效果的評(píng)價(jià)方法主要包括分子生物學(xué)評(píng)價(jià)法和細(xì)胞培養(yǎng)評(píng)價(jià)法，養(yǎng)殖場只能采用分子生物學(xué)評(píng)價(jià)法，但由于被滅活病毒的核酸有可能檢測出陽性，存在假陽性現(xiàn)象。

3）采用哨兵豬來評(píng)價(jià)消毒成效

恢復(fù)生產(chǎn)前，可以選擇 10 ～20 頭非洲豬瘟陰性健康的豬，作為“哨兵”，進(jìn)場自由活動(dòng) 30d，并每天觀察臨床癥狀，采集樣品進(jìn)行檢測，確保豬場消毒徹底衛(wèi)生。

2008 年 FAO ／ OIE ／世界銀行發(fā)布了針對養(yǎng)殖業(yè)的生物安全(Biosecurity) 的定義是：為降低病原體傳入和散布風(fēng)險(xiǎn)而實(shí)施的措施。生物安全的中心思想是隔離、消毒和防疫。應(yīng)用到非洲豬瘟防控的方案就是隔離和消毒，消毒需要根據(jù)現(xiàn)場環(huán)境和消毒劑等綜合因素進(jìn)行考慮，選擇好消毒劑，規(guī)范使用，才能建立起針對非洲豬瘟的生物安全網(wǎng)。